Prinsip asas sintesis DNA

Sintesis DNA kimia adalah berdasarkan strategi sintesis fasa pepejal dan kimia fosforamidit. Berbeza dengan sintesis DNA biologi, bahan dalam sintesis DNA kimia ialah DMT (4, 4-dimetoksitritil) dan deoksiriboksisida yang diubah suai fosforamidit, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1. Sintesis DNA dijalankan pada sokongan pepejal (kami boleh menawarkan pelbagaiLajur Sintesis Oligo), iaitu CPG (kaca liang terkawal) dan PS (polistirena), dan keseluruhan sintesis dilakukan pada aPensintesis DNA/RNA, yang merupakan peralatan utama kami, mempunyai model yang berbeza seperti: Pensintesis Saluran Tunggal HY, HY-12, HY-192 dan sebagainya, arah sintesis adalah dari 3' hingga 5', dan nukleotida diperkenalkan kepada sokongan pepejal melalui satu kitaran sintesis. Kitaran sintesis biasanya mengandungi empat langkah, Penyahperlindungan, Gandingan, Penutupan dan Pengoksidaan (Rajah 2). Penyahperlindungan ditetapkan untuk menyingkirkan kumpulan DMT pada sokongan pepejal atau kumpulan hidroksil 5' pada nukleosida sebelumnya, asid trikloroasetik 3% dalam diklorometana digunakan sebagai reagen penyahperlindungan. Kemudian deoksiriboksisida yang diubah suai fosforamidit dibenarkan untuk mendedahkan kumpulan hidroksil dengan bantuan pengaktif, iaitu 5-etiltiotetrazol atau 4,5-dicyanoimidazol, membentuk fosfitetriester (III), dan mencapai langkah Gandingan. Langkah penutupan dijalankan untuk menyekat kumpulan hidroksil yang tidak bertindak balas semasa langkah gandingan, bagi meminimumkan pembentukan jujukan kecacatan yang tidak diingini. Akhir sekali, fosfitetriester (III) yang tidak stabil dioksidakan kepada fosfortriester (V) yang stabil secara kimia dengan iodin sebagai pengoksida dalam piridina.

DNA yang disintesis boleh dibelah daripada sokongan pepejal melalui aminolisis, kumpulan terlindung 2-sianoetil pada fosfortriester dan amida pada nukleobes dibelah pada masa yang sama, Plat Sintesis dan Lajur Sintesis dalam rak diletakkan terus di dalam ruang tindak balasPeralatan PenyahlindunganDNA mentah boleh disediakan melalui HPLC, elektroforesis dan OPC atas permintaan, kami juga boleh menyediakan andaPeralatan Penulenanuntuk Pemprosesan Pasca.