Prinsip asas sintesis DNA

Sintesis DNA kimia adalah berdasarkan strategi sintesis fasa pepejal dan kimia fosforamidit.Berbeza daripada sintesis DNA biologi, bahan dalam sintesis DNA kimia ialah DMT (4, 4-dimethoxytrityl) dan deoxyriboxyside diubah suai fosforamidit, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1. Sintesis DNA dijalankan pada sokongan pepejal (kami boleh menawarkan pelbagaiLajur Sintesis Oligo), iaitu CPG (kaca liang terkawal) dan PS (polistirena), dan keseluruhan sintesis dilakukan padaPensintesis DNA/RNA, yang merupakan peralatan utama kami, mempunyai model yang berbeza seperti: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 dan lain-lain, arah sintesis adalah dari 3' hingga 5', dan nukleotida diperkenalkan kepada sokongan pepejal melalui satu kitaran sintesis.Kitaran sintesis lazimnya mengandungi empat langkah, Penyahlindungan, Gandingan, Penyekat dan Pengoksidaan (Rajah 2).Deprotection ditetapkan untuk mengeluarkan kumpulan DMT pada sokongan pepejal atau kumpulan hidroksil 5' pada nukleosida sebelumnya, asid trikloroasettik 3% dalam diklorometana digunakan sebagai reagen penyahlindungan.Kemudian deoxyriboxyside yang diubah suai fosforamidit dibenarkan untuk mendedahkan kumpulan hidroksil dengan bantuan pengaktif, iaitu 5-ethylthiotetrazol atau 4, 5-dicyanoimidazole, membentuk phosphitetriester (III), dan merealisasikan langkah Gandingan.Langkah Capping dijalankan untuk menyekat kumpulan hidroksil yang tidak bertindak balas semasa langkah gandingan, untuk meminimumkan pembentukan jujukan kecacatan yang tidak diingini.Akhirnya, phosphitetriester (III) yang tidak stabil dioksidakan kepada phosphotriester stabil kimia (V) dengan iodin sebagai oksidan dalam kehadiran piridin.

DNA yang disintesis boleh menjadi belahan daripada sokongan pepejal oleh aminolisis, kumpulan terlindung 2-cyanoethyl pada phosphotriester dan amida pada nukleobase dibelah pada masa yang sama, Plat Sintesis dan Lajur Sintesis dalam rak diletakkan terus di dalam ruang tindak balas. daripadaPeralatan Nyahlindung.DNA mentah boleh disediakan oleh HPLC, elektroforesis dan OPC atas permintaan, kami juga boleh memberikan andaPeralatan Pemurnianuntuk Pasca pemprosesan.